Identificação de mutações no gene PTPN11 nas neoplasias mieloides pediátricas

Abstract

Introdução: Mutações no gene PTPN11 são identificadas em doenças mieloproliferativos (DMP) e leucemia mielóide aguda (LMA) e estão associadas com a ativação inapropriada da via RAS/MAPK em células mieloides. O diagnóstico diferencial entre DMP e LMA na infância é um desafio e, para isso, considera-se a idade, porcentagem de blastos, citogenética, ausência da fusão gênica BCR-ABL1, mutações no PTPN11 e a monossomia do cromossomo 7 (-7). Objetivos: O foco deste estudo foi identificar mutações genéticas na via RAS/MAPK, com ênfase no PTPN11, a fim de distinguir mutações somáticas e constitutivas. Comparar o perfil mutacional do PTPN11 nas LMAs pediátricas e outras neoplasias mieloides. Metodologia: Uma série de 412 casos de neoplasias mieloides <19 anos de idade foi incluído no estudo [LMA (n, 357); leucemia mielomonocítica juvenil (LMMJ) (n, 14); leucemia mieloide crônica (LMC) (n, 30) e síndrome mielodisplásica (SMD) (n, 11)]. A identificação de fusões gênicas RUNX1-RUNX1T1, CBFb-MYH11, PML-RARa, BCR-ABL1, rearranjos do KMT2A (r-KMT2A) e mono 7 foi realizada através de FISH, RT-PCR, e/ou RT-PCR multiplex. As mutações em FLT3-D835 (éxon 20), duplicações em tandem (ITD) no FLT3 (éxons 11/12), RAS (éxon 1) e KIT (éxons 8/17) foram analisadas por PCR e sequenciamento. Mutações nos éxons 3 e 13 do gene PTPN11 foram detectadas pela técnica de HRM e confirmados por sequenciamento direto. Os cálculos das frequências e análises univariadas foram realizados utilizando os testes χ2

e exato de Fisher. As estimativas de sobrevida global (SG) foram realizadas pelo método de Kaplan-Meier e pelo teste de Log-Rank. Resultados: A maioria dos casos de DMP e LMA foram >11 anos de idade (46,8%), comparado com os casos com idade ≤2 anos (17,5%) e >2-10 anos de idade (35,7%). O subtipo morfológico mielomonocítico (LMA-M4) foi predominante (23,3%). Entre os casos de LMA, RUNX1-RUNX1T1 foi majoritariamente encontrada entre os pacientes com idade entre 2-10 anos (51,2%; mediana da idade= 8,6; p=0,027). O r-KMT2A foi predominante em crianças com a idade ≤2 anos (59,0%; mediana da idade= 1,4; p<0,0001). Com relação às mutações em genes da via RAS/MAPK, alterações no gene FLT3 foram mais frequentes nas crianças ≥11 anos de idade (64,1%; mediana= 11,4; p=<0,0001). Mutações no éxon 3 do gene PTPN11 foram identificadas nos códons D61, A72, E76 e H85 em 8,0% (28/339) dos casos de neoplasias mieloides. A monossomia do 7 foi detectada em três casos (11,5%), que também apresentaram alterações no PTPN11. Mutações no PTPN11 conferiram uma menor SG em 5 anos em pacientes com LMA (mediana 3,3; IC95% 0,2-6,4; p<0,001). Conclusão: Mutações no gene PTPN11 são amplamente identificadas em diferentes malignidades hematopoiéticas e podem auxiliar no conhecimento do perfil genético e biológico das neoplasias mieloides no Brasil.