A Comparative Evaluation of Acetylcholinesterase Inhibition by AChE-ICER and in vitro EllŵaŶ’s Modified Method of Siŵplified Analogs 3-O-Acetyl-N-Benzyl-Piperidine of Donepezil

Abstract

Inibidores de Acetilcolinesterase (AChEI) ainda são os melhores fármacos usados para a terapêutica da doença de Alzheirmer (DA). Dentre os IAChEs disponíveis, o donepezil apresenta a maior meia-vida, os efeitos colaterais mais brandos, além de segurança e tolerância satisfatórias; portanto, este tem sido utilizado como medicamento de primeira escolha no tratamento de DA leve a moderada. A triagem bem sucedida de novos AChEI depende de métodos rápidos e eficientes. Os ensaios empregados mais frequentemente são baseados no uso do reagente de Ellman (ensaio colorimétrico) ou do reagente Fast Blue B, além de métodos radioquímicos, espectrométricos ou cromatográficos. Uma abordagem mais recente utiliza a enzima imobilizada em reator capilar, acoplada a um sistema cromatográfico, que é conhecido como ICER (do inglês immobilized capillary enzyme reactor). Como parte de um projeto que visa à identificação de novos IAChEs, este artigo descreve a avaliação comparativa da atividade inibitória da AChE de uma série de derivados 3-O-acetil-N-benzilpiperidínicos substituídos por duas diferentes abordagens: método de Ellman modificado in vitro e uma metodologia de ICER. Embora nenhum dos compostos da série tenha apresentado alta atividade inibitória, todos os ensaios revelaram resultados consistentes, demostrando que é possível aplicar diferentes metodologias confiáveis para a busca e idendificação de novos inibidores de AChE.