Avaliação do papel dos corpúsculos lipídicos na carcinogênese esôfagica

Abstract

O câncer de esôfago (CE) é a sexta causa mais freqüente de morte por câncer. Existem dois tipos principais de CE: Carcinoma Epidermóide (CEE) e Adenocarcinoma (ADE). Para o desenvolvimento do CEE os principais fatores de risco são o consumo de tabaco e álcool, e para o ADE podemos citar o refluxo esôfago-gástrico, obesidade e o esôfago de Barrett (EB), uma condição onde o epitélio estratificado do esôfago é substituído por um epitélio colunar metaplásico intestinal. Corpúsculos lipídicos (CL) são inclusões citoplasmáticas envolvidas na produção de eicosanóides e são mais abundantes em células associadas a reações inflamatórias e neoplasias. Sabendo que o processo inflamatório desempenha um papel importante no CE, o objetivo deste trabalho foi avaliar o papel dos CLs no CE. Primeiramente foi avaliada a presença de CL em amostras humanas de esôfago. Não houve marcação para ADRP nas amostras de esôfago normal, entretanto, houve um aumento gradativo na marcação dessa proteína na evolução do ADE e a marcação em CEE foi positiva em apenas poucos casos. Avaliamos também linhagens celulares de CE e observamos um aumento no número de CL na linhagem de ADE (OE33), quando comparada à linhagem de esôfago normal (Het1A) e a linhagem de CEE (OE21), corroborando os resultados anteriores. Para entender como os CLs eram formados já nos estágios iniciais de desenvolvimento do ADE, a linhagem Het1a, foi submetida a insultos que mimetizam os principais fatores de risco associados ao ADE e foi observado um aumento no número de CL quando incubada com pH ácido, ácidos biliares, nicotina e ácido oleico. Além disso, esses estímulos foram capazes de induzir aumento na expressão de genes associados à resposta inflamatória e também de gene envolvido no desenvolvimento do EB. Avaliamos também esses estímulos nas células tumorais e observamos que apenas a linhagem OE33 apresentou aumento no número de CL e aumento na expressão de IL-8 e COX-2. Com objetivo de entender melhor a diferença do número de CLs entre ADE e CEE foi realizada marcação para COX-2 nessas amostras e observamos que não houve diferença na marcação entre esses dois tipos tumorais, no entanto houve uma correlação positiva entre a marcação para CL e COX-2 nas amostras de ADE. Seguimos para caracterização da expressão de genes associados à reposta inflamatória. Foi observado um aumento da expressão de COX-2 e TLR4 na linhagem OE33, que foi acompanhado pelo aumento na produção de PGE2 e IL-8, quando comparada à OE21. A ativação de TLR4 induziu aumento de CL, transativação de NFκB, produção de IL-8 e PGE2 apenas na linhagem OE33. E a aspirina foi capaz de inibir esses efeitos. No entanto, não houve diferença na marcação para NFκB nas amostras humanas de ADE e CEE. Nosso próximo passo foi avaliar se os insultos que mimetizam os fatores de risco associados ao ADE eram capazes de ativar o receptor TLR4, porém isso não foi confirmado. Uma vez que os CLs concentram mediadores inflamatórios e estão presentes em níveis aumentados já em estágios iniciais do desenvolvimento do ADE, podemos concluir que os CLs apresentam um papel relevante na carcinogênese desse tumor, o que não ocorre para o CEE.