Estudo das alterações citogenéticas e epigenéticas em síndrome mielodisplásica pediátrica

Abstract

A síndrome mielodisplásica (SMD) compreende um grupo heterogêneo de neoplasias hematológicas. A etiopatologia da SMD é complexa e ainda não se sabe a causa de seu surgimento, principalmente nos pacientes pediátricos devido a sua raridade. Embora avanços rápidos tenham sido feitos na SMD no adulto, a genética e epigenética da SMD pediátrica ainda são pouco compreendidas. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi caracterizar as alterações citogenéticas e epigenéticas em pacientes pediátricos com SMD primária para verificar sua associação com o desenvolvimento da SMD e sua evolução para LMA, buscando identificar marcadores de diagnóstico e prognóstico. A análise citogenética foi realizada por bandeamento GTG e FISH. O estudo de expressão dos genes DNMTs, TET2 e APOBEC3B foi realizada por PCR quantitativa em tempo real. O perfil de metilação global através de LINE-1 e a metilação do gene p15INK4B foram estudados por pirosequenciamento. Nossos resultados mostraram a presença de cariótipos anormais em 55% dos 152 pacientes estudados. As alterações citogenéticas mais observadas foram a -7, del(11)(q23) e cariótipos complexos. Pacientes apresentaram super-expressão das DNMTS em relação aos doadores (DNMT1 (p= 0,01); DNMT3A (p = 0,02) e DNMT3B (p= 0,01). Esse aumento de expressão esteve associado ao desenvolvimento e evolução da SMD para LMA (DNMT1 p= 0.03, DNMT3A p= 0.02, DNMT3B p= 0.004). A expressão de TET2 e APOBEC3B não diferiu estatisticamente entre os doadores. APOBEC3B apresentou expressão aumentada em pacientes com cariótipo normal (p= 0,04) e apresentava expressão coodernada com DNMT3A e DNMT3B. A hipermetilação do gene p15INK4B foi observada em 35% (15/43) dos pacientes, estando mais presente em AREB/AREB-t (60%). Cariótipos anormais estiveram associados com a hipermetilação em p15INK4B (p<0,006), sendo as principais alterações: -7/del7q (p< 0,003). Pacientes pediátricos apresentam hipometilação global em 97% (69/71) dos casos. A hipometilação global esteve presente desde o estágio inicial (CRI) (p= 0,01) até os estágios mais avançados (AREB/AREB-t) (p= 0,005) em relação aos doadores. Pacientes com cariótipos anormais (p= 0,004) e com evolução da doença (p= 0,002) apresentaram maior porcentagem de hipometilação global em relação aos doadores. Nossos resultados mostraram que durante o desenvolvimento e evolução de SMD para LMA há um desbalanço progressivo na maquinaria de metilação e desmetilação, havendo o aumento de expressão das DNMTs e a diminuição de expressão de TET2 com a evolução da doença. A hipometilação global esteve presente desde a fase inicial sendo mais expressiva nos estágios mais avançados e com a evolução para LMA, enquanto a hipermetilação em p15INK4B foi um evento mais tardio associado à progressão da SMD, principalmente nos pacientes que apresentaram -7/del7q. Em conjunto nossos resultados sugerem um modelo de evolução de SMD para LMA.